顯微鏡的三種照明方式

顯微鏡的三種照明方式

    不同種類(lèi)的顯微鏡的功能不同，所觀察的樣品也是有區(qū)別的。為了獲得良好的工作效果，顯微鏡必須注意照明的正確使用。顯微鏡的照明方式，按其用途可以分成三類(lèi)。

    1.用透射光照明。主要應(yīng)用于生物顯微鏡，并且在生物學(xué)檢驗(yàn)上用的最多最廣，一般在數(shù)值孔徑小的低倍物鏡，可采用一種最簡(jiǎn)單的照明器，用一凹面鏡(或平面鏡)，使自然光經(jīng)凹面鏡后被會(huì)聚在載物片的樣品上。對(duì)于高倍鏡或油浸物鏡，必須采用專(zhuān)門(mén)的聚光器，使寬大的平行光束經(jīng)集光鏡后被會(huì)聚成與物鏡孔徑相適應(yīng)的錐形光束，方能滿足物鏡分辨本領(lǐng)的需要。而另一方面也增加了樣品的亮度。采用透射光照明，還有兩種方法，一種是將光線聚焦在標(biāo)本上，稱(chēng)作臨界照明，如果光源表面亮度不均勻，則在載物片上也反映出來(lái)，如燈絲像等。在微型顯微鏡中，為了消除這一缺點(diǎn)，在集光器下面的藍(lán)色濾光片的一面，采用磨砂而減少像的亮度不均勻現(xiàn)象。另一種方法叫庫(kù)勒照明。由光源發(fā)出的光先經(jīng)過(guò)毛玻璃L，再經(jīng)過(guò)透鏡把毛玻璃的像呈在集光器下部的光欄處，集光器把光欄的像呈在物面上，并且把:像呈在無(wú)限遠(yuǎn)，這種照明，即使光源本身亮度不均勻，而在標(biāo)本上的照明也是十分均勻的。而且調(diào)整好孔徑，還可以減少雜散光的影響。

2.用于非透明體的照明。例如側(cè)射照明的體視顯微鏡，或同軸照明的金相顯微鏡。對(duì)于非透明體光線不能透射，這時(shí)只能從側(cè)面斜射照亮標(biāo)本。當(dāng)用低倍物鏡時(shí)，有一定的工作距離，可以從上邊或旁邊照射被觀察物的表面，使漫射光進(jìn)人物鏡，這時(shí)不能用蓋玻片，否則規(guī)則的反射光將進(jìn)人物鏡影響觀察。因?yàn)槭菃蜗騻?cè)面照明，這樣被觀察的標(biāo)本可能有些變形。為了糾正這一缺點(diǎn)，還可以把物鏡放在環(huán)形光束中，采用全向照明。

3.用暗視場(chǎng)觀察微粒的照明。在通常的阿貝集光器下面，加一個(gè)環(huán)形光闌，將中間光線遮住，僅使邊緣光線進(jìn)人集光，由于光線沒(méi)有直接進(jìn)人物鏡，因此視場(chǎng)背景是暗的，可以做暗視場(chǎng)的透明體觀察。這種照明對(duì)于線形或點(diǎn)形，細(xì)微結(jié)構(gòu)透明體觀察，如矽藻殼皮、動(dòng)植物的各種組織、血液和含有細(xì)菌的液體等有較好的效果。